潮霉素 B 溶液（50 mg/mL）

一、產(chǎn)品簡介

潮霉素 B 是由吸水鏈霉菌代謝產(chǎn)生的氨基糖苷類抗生素，本品為 50 mg/mL 無菌水溶液，經(jīng) 0.22 μm 濾膜過濾除菌，無熱源、無雜菌污染。其作用機(jī)制為靶向抑制原核與真核生物核糖體 70S/80S 亞基的肽基轉(zhuǎn)移酶活性，阻斷多肽鏈延伸，最終造成細(xì)胞翻譯過程終止、細(xì)胞凋亡。主要用于微生物菌種篩選、植物農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化體系抗性篩選、酵母、昆蟲細(xì)胞、哺乳動物穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建的陽性克隆篩選，配套 hph 抗性標(biāo)記基因使用，是基因工程、轉(zhuǎn)基因材料鑒定中高頻使用的篩選抗生素，溶液穩(wěn)定性好，批次均一，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性高。

二、使用方法

1. 微生物篩選：細(xì)菌 LB 培養(yǎng)基終濃度 50–100 μg/mL，酵母 YPD 培養(yǎng)基終濃度 200–300 μg/mL，培養(yǎng)基溫度降至 50℃以下再加入，避免高溫降解失效。

2. 植物組培篩選：擬南芥、水稻、煙草等愈傷組織及分化培養(yǎng)基終濃度 25–50 μg/mL，侵染后共培養(yǎng)結(jié)束再添加進(jìn)行抗性壓篩。

3. 動物細(xì)胞篩選：貼壁細(xì)胞培養(yǎng)液終濃度 100–200 μg/mL，連續(xù)篩選 7–14 天，直至陰性對照組細(xì)胞全部死亡，挑取存活單克隆擴(kuò)增培養(yǎng)。

三、儲存條件

未開封產(chǎn)品置于 2～8℃避光冷藏，有效期 12 個(gè)月；長期不用可分裝為小規(guī)格于 - 20℃凍存，減少反復(fù)凍融帶來的活性損耗。開蓋后盡快用完，若液體出現(xiàn)渾濁、沉淀、顏色變深，禁止繼續(xù)使用。

潮霉素 B（Hygromycin?B）是吸水鏈霉菌代謝產(chǎn)生的氨基糖苷類抗生素，CAS：31282049，分子量 527.52?g/mol。作用機(jī)制為結(jié)合核糖體，干擾蛋白翻譯過程，對細(xì)菌、真菌、哺乳動物細(xì)胞、植物細(xì)胞均具有殺傷效果；攜帶hph/hyg抗性基因的細(xì)胞可表達(dá)潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶，使藥物磷酸化失活而存活。本品為科研級無菌儲存液，專用于篩選、維持穩(wěn)定轉(zhuǎn)染抗性基因的細(xì)胞株，可與 G418、Zeocin 等聯(lián)用做多抗性篩選，僅用于體外科研，不可用于臨床、動物體內(nèi)給藥。

潮霉素 B 溶液（50 mg/mL）