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醋酸纖維薄膜電泳緩沖液(pH8.6)五大優(yōu)點
更新時間:2023-03-10   點擊次數(shù):1259次

醋酸纖維薄膜電泳緩沖液(pH8.6)五大優(yōu)點


電泳緩沖液是核酸、蛋白質凝膠電泳系統(tǒng)的一個重要組成, 是電泳場中的導體,也是維持電泳系統(tǒng)恒定 pH值的必要條件。其成分及其離子強度影 響物質的電泳遷移率,應避免與被分離的樣 品發(fā)生化學反應而改變樣品的理化性質或使 其喪失生物活性。電泳緩沖液中的EDTA 可螯合Mg離子等二價陽離子,防止電泳時激 活DNA酶及Mg離子與核酸生成沉淀。


電泳緩沖液操作簡單、快速、廉價。已經(jīng)廣泛用于血清蛋白,血紅蛋白,球蛋白,脂蛋白,糖蛋 白,甲胎蛋白,類固醇激素及同工酶等的分離分析中,盡管它的分辨力比聚丙酰胺凝膠電泳低,但它具有簡單,快速等優(yōu)點


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1.(1)醋酸纖維薄膜對蛋白質樣品吸附極少,無“拖尾"現(xiàn)象,染色后背景能*脫色,各種蛋白質染色帶分離清晰,因而提高了測定的精確性。

(2)快速省時。由于醋酸纖維薄膜親水性較濾紙小,薄膜中所容納的緩沖液也較少,電滲作用小,電泳時大部分電流是由樣品傳導的,所以分離速度快,電泳時間短,一般電泳45—60min即可,加上染色,脫色,整個電泳完成僅需90min左右。

(3)靈敏度高,樣品用量少。 血清蛋白僅需2μl血清,甚至加樣體積少至0.1μl,僅含5μg蛋白樣品也可得到清晰的分離帶。臨床醫(yī)學檢驗利用這一點,檢測在病理情況下微量異常蛋白的改變。

(4)應用面廣。某些蛋白在紙上電泳不易分離,如胎兒甲種球蛋白,胰島素,組蛋白等用醋酸纖維薄膜電泳能較好地分離。

(5)醋酸纖維薄膜電泳染色后,經(jīng)冰乙酸,乙醇混合液或其它溶液浸泡后可制成透明的干板,有利于掃描定量及長期保存。

2、醋酸纖維薄膜電泳與聚丙烯酰胺凝膠電泳相比,操作簡單,但分離效果不太好。如血清蛋白在醋酸纖維素薄膜電泳中,只能分離出5—6條區(qū)帶,而聚丙烯酰胺凝膠電泳可分離出數(shù)10條區(qū)帶。







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