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研究生肌中藥實(shí)驗(yàn)

肌，狹義稱為肌肉，廣義包括骨、脈、筋、肉、神經(jīng)、皮膚、黏膜等組織。生肌，即應(yīng)用益氣、補(bǔ)血、滋陰、助陽等扶助正氣藥物，內(nèi)服或外用，營養(yǎng)骨、脈、筋等組織，加速細(xì)胞再生、組織修復(fù)?，F(xiàn)代病理學(xué)認(rèn)為潰瘍傷口的愈合是再生的肉芽組織的充填及上皮組織覆蓋而愈合的過程，“生肌”就是促進(jìn)這個過程的完成。到目前為止，在促進(jìn)慢性難愈性創(chuàng)面的愈合方面，生肌類中藥對于慢性難愈性創(chuàng)面確有療效，但其作用機(jī)制不清，因此生肌中藥近年來的實(shí)驗(yàn)研究主要集中于研究其在創(chuàng)面愈合，特別是在慢性難愈性創(chuàng)面中的作用機(jī)制。據(jù)第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院整形外科和中醫(yī)科歸納，生肌中藥對創(chuàng)面愈合的機(jī)制研究進(jìn)展情況如下：

■對纖維結(jié)合蛋白（FN）的影響

FN是一種相對分子質(zhì)量約為450000的大分子糖蛋白，與膠原具有特別的親和力。參與傷口愈合的全過程，在創(chuàng)面修復(fù)的許多環(huán)節(jié)中都起著重要作用，F(xiàn)N含量的提高有利于創(chuàng)傷愈合。其作用主要有：參與凝血，促進(jìn)血小板的積累與黏附；對細(xì)胞具有化學(xué)趨化與遷移作用，可加速創(chuàng)面的清創(chuàng)，促進(jìn)肉芽形成，加速創(chuàng)面上皮化；非特異的調(diào)理作用；在細(xì)胞的移行、上皮化過程中起支架作用。而生肌中藥可有效的提高血清及創(chuàng)面組織中FN含量，從而促進(jìn)創(chuàng)面愈合。

■對創(chuàng)面微量元素、pH值的影響

創(chuàng)面營養(yǎng)、微量元素、pH值對于創(chuàng)面愈合起一定作用，不可忽視。李斌等研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)黃膏作用大鼠創(chuàng)面后組織中Zn含量明顯升高，而Cu含量不變，因此生肌中藥對Zn創(chuàng)面趨化作用影響是其促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機(jī)制之一。陳建鋒等發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用生肌中藥可使創(chuàng)面pH值由堿性轉(zhuǎn)為酸性，有利于創(chuàng)面愈合。

■對創(chuàng)面生長因子的作用

生長因子在創(chuàng)面愈合中起著起始、調(diào)節(jié)與控制的重要作用。它不僅參與炎性細(xì)胞趨化與促進(jìn)成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖與基質(zhì)的形成，而且對后期的組織改建亦有重要影響。南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院姚昶等利用生肌玉紅膏研究其對小鼠創(chuàng)面中的bFGF含量影響，結(jié)果在創(chuàng)面修復(fù)的炎癥和增殖期，生肌玉紅膏可顯著增加bEGF水平，從而促進(jìn)創(chuàng)面膠原的合成和上皮的生長；在塑型期，又降低bFGF水平，促進(jìn)超常增生膠原降解，使其排列有序，減少瘢痕形成。

上海中醫(yī)藥大學(xué)李斌等應(yīng)用復(fù)黃生肌愈創(chuàng)油膏作用于大鼠潰瘍模型，結(jié)果使局部創(chuàng)面組織表皮生長因子受體（EGFR）增加，并以此推斷復(fù)黃生肌愈創(chuàng)油膏有促進(jìn)局部創(chuàng)面組織細(xì)胞（巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等）分泌生長因子的作用。黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)李令根等證明殼聚糖中藥復(fù)合藥膜（含有紫草、當(dāng)歸、白芷、血竭、珍珠等中藥有效成分及基質(zhì)殼聚糖）可以促進(jìn)大鼠體表潰瘍創(chuàng)面的VEGF水平升高。哈爾濱市中醫(yī)院王春明等也證明，生肌軟膏可以促進(jìn)大鼠創(chuàng)面VEGF水平升高。

■促進(jìn)創(chuàng)面的血液循環(huán)

動脈缺血、靜脈瘀血和局部的失神經(jīng)或神經(jīng)病變是慢性難愈性創(chuàng)面的直接原因，創(chuàng)面局部的成纖維細(xì)胞和表皮細(xì)胞的分裂繁殖速度減慢和細(xì)胞外基質(zhì)合成減少、分解加速是創(chuàng)面經(jīng)久不愈的病理基礎(chǔ)，因而促進(jìn)創(chuàng)面的血液循環(huán)對于促進(jìn)創(chuàng)面愈合非常重要。上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院章學(xué)林等發(fā)現(xiàn)復(fù)黃生肌膏作用的大鼠創(chuàng)面的肉芽溫度與周圍皮膚溫度之差明顯高于不給藥的對照組，間接證明生肌中藥可以改善創(chuàng)面的血液循環(huán)。

■對創(chuàng)面成纖維細(xì)胞及Ⅰ、Ⅲ型膠原的作用

有研究表明，成纖維細(xì)胞是創(chuàng)面愈合過程中的主體細(xì)胞，其生物學(xué)效應(yīng)在創(chuàng)面修復(fù)中起著至關(guān)重要的作用，成纖維細(xì)胞所合成的膠原是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分，膠原代謝的結(jié)果直接影響創(chuàng)面的修復(fù)質(zhì)量，在創(chuàng)面愈合過程中起主要作用的是Ⅰ、Ⅲ型膠原，Ⅰ型膠原起支架作用，Ⅲ型膠原決定膠原纖維的直徑大小和彈性好壞，Ⅰ、Ⅲ型膠原含量的比值關(guān)系到zui終的修復(fù)結(jié)果。因此研究生肌中藥對創(chuàng)面中成纖維細(xì)胞及Ⅰ、Ⅲ型膠原的作用是解釋其作用機(jī)制的重要方法。魏振東等通過對中藥去腐生肌散促進(jìn)實(shí)驗(yàn)動物皮膚潰瘍修復(fù)作用的病理觀察發(fā)現(xiàn)，術(shù)后12天，中藥治療組較凡士林紗布換藥的對照組成纖維細(xì)胞不但數(shù)量增多，而且功能活躍，胞體增大；術(shù)后15天成纖維細(xì)胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)，游離核糖體含量豐富，間質(zhì)中含較多纖細(xì)的膠原纖維。更有多項(xiàng)研究證實(shí)，生肌中藥使創(chuàng)面中成纖維細(xì)胞增多，促進(jìn)細(xì)胞增殖，使細(xì)胞增殖周期啟動，細(xì)胞有絲分裂加速，功能活動加強(qiáng)。上海中醫(yī)藥大學(xué)董莉等采用體外培養(yǎng)創(chuàng)面肉芽組織成纖維細(xì)胞，以乳鼠皮膚成纖維細(xì)胞作對照，加入生肌方、化瘀方及生肌化瘀方大、小劑量藥物血清，檢測成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原的含量。結(jié)果生肌方能夠明顯提高創(chuàng)面成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原的含量；化瘀方能夠降低創(chuàng)面成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原含量，生肌化瘀方大、小劑量組Ⅰ、Ⅲ型膠原含量與正常組比較無顯著性差異。因此認(rèn)為生肌化瘀方能夠促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù)，其可能的作用機(jī)制是通過調(diào)節(jié)Ⅰ、Ⅲ型膠原的比值來調(diào)控Ⅰ、Ⅲ型膠原代謝。

■調(diào)節(jié)創(chuàng)面免疫功能

創(chuàng)面愈合中首先應(yīng)激反應(yīng)動員骨髓提前釋放出的幼稚單核細(xì)胞，中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞入血，由于毛細(xì)血管的通透性增加與多種化學(xué)趨化因子的作用造成大量炎性細(xì)胞局部浸潤。創(chuàng)面的中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞是創(chuàng)面的主要免疫活性細(xì)胞。李秀蘭等用生肌膏作用于兔感染創(chuàng)面模型后，觀察到創(chuàng)面在換藥后7~14天出現(xiàn)全血中性粒細(xì)胞高峰，與對照組有顯著性差異。提示外用生肌中藥可激活中性粒細(xì)胞，使其出現(xiàn)呼吸暴發(fā)，增強(qiáng)其氧化代謝功能。山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院李應(yīng)全等應(yīng)用生肌愈皮膏作用豚鼠創(chuàng)面，發(fā)現(xiàn)可增加腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù)，并提高豚鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化百分率，從而增強(qiáng)創(chuàng)面的免疫功能。王春明等也證明，應(yīng)用生肌軟膏后創(chuàng)面的巨噬細(xì)胞明顯增多。有研究觀察祛腐生肌軟膏對大鼠瘡瘍模型作用，發(fā)現(xiàn)可增加補(bǔ)體C3、IgA及IgM的含量，增加膿性分泌物中溶菌酶含量，并增加胸腺指數(shù)及脾臟指數(shù)的作用，從而增強(qiáng)創(chuàng)面免疫力，促進(jìn)愈合。