睪酮(T)檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)介
英文名 Testosterone
別 稱 睪酮
化學(xué)式 17β-羥基雄甾-4-烯-3-酮丙酸酯
分子量 288.42
CAS登錄號(hào) 58-22-0
EINECS登錄號(hào) 200-370-5
熔 點(diǎn) 152-156 °C
沸 點(diǎn) 432.9°C at 760 mmHg
密 度 1.12g/cm3
外 觀 白色結(jié)晶無(wú)臭固體
安全性描述 S24/25
危險(xiǎn)性符號(hào) Xn:Harmful
危險(xiǎn)性描述 Xn:Harmful
分子式 C19H28O2
BRN號(hào) 1915399
PubChem號(hào) 24899970
RTECS號(hào) XA3030000
MDL號(hào) MFCD00003654
睪酮(T)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)技術(shù)簡(jiǎn)介
雙抗體夾心法
1. 包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過(guò)夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡(jiǎn)稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。（同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔）。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。
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